马槟榔甜蛋白基因(MBLⅡ)的拼接与表达载体的构建

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从云南植物Capparis masaikai中提取总DNA,设计引物克隆马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ,序列测定后经同源性分析表明与GeneBank中登陆的马槟榔甜蛋白基因MBLⅡ(cDNA)序列一致,表明MBLⅡ不存在内舍子序列。利用重叠区扩增基因拼接法(gene splicing by overlap extension,gene SOEing)进行体外基因剪接,剪接片段与植物表达载体pVKH相连,构建pVKH-35S—MBLⅡ-Pa、pYKH—35S—S-A+B-pA、pVKH-35S-A+B—pA、pV
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