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目的
探讨Akt1增强胶质瘤放、化疗抵抗的机制。
方法通过免疫荧光实验检测正常星形细胞和4种恶性胶质瘤细胞(U87、U251、SF767以及U373)中泛素结合酶E2S(UBE2S)的表达情况；通过Western blot实验检测PTEN基因突变型和野生型胶质瘤细胞中UBE2S的表达差异；构建激活型Akt1载体，分别与UBE2S野生型或T152位点突变型载体共表达，观察PTEN/Akt信号通路对UBE2S的作用，以及UBE2S过表达后对非同源末端连接复合物的影响；采用流式细胞仪检测稳定敲低UBE2S的U87胶质瘤细胞对放、化疗的敏感性。
结果与正常星形细胞相比，胶质瘤细胞高表达UBE2S蛋白；PTEN突变型的胶质瘤细胞UBE2S的表达较野生型更稳定。构建激活型Akt1磷酸化UBE2S的T152位点，可促进UBE2S的稳定表达。UBE2S与Ku70、Ku80相互作用能促进Ku70的表达(P＝0.009)。免疫印迹结果显示，敲低UBE2S的表达后，Ku70、Ku80和DNA-PKcs的表达量显著降低(P<0.001)。流式细胞检测结果显示，UBE2S敲低可增强胶质瘤对放、化疗的敏感性(P<0.001)。
结论UBE2S在恶性胶质瘤中高表达；Akt1可磷酸化UBE2S的T152位点，从而增强UBE2S的稳定性；敲低UBE2S能降低非同源末端连接复合物介导的DNA修复效率，从而增强胶质瘤细胞对放、化疗的敏感性。