论文部分内容阅读
目的:探索目标基因与 Bhas42细胞转化试验结合成为检测化合物致癌促长活性新的筛选方法的可能性。方法取促癌化合物佛波酯(TPA)作为阳性物,采用 Bhas42转化细胞作为实验体系。接种当日为第0天(d 0),d 4将培养基换成含有 TPA 0.05 mg·L -1或0.5% DMSO 的 DF5F 培养基,在加入相应受试化合物的24,48及72 h 后取样。样品经过预处理后对抽提的 RNA 进行质量评价,采用 RT-PCR 方法检测 Ccnb1,Rif1,Mc m3,Chek1,Jun,Fosl1,Hells,Vegfa,St mn1,Prl2c3,Scarb1,Phex,Orm1,Orm2, Nup54,Slc2a1,Il1 rl1,Rad51 ap1,Tfrc,Ab1,Car13和 Pik3r5在不同时间点的表达。结果与阴性对照组相比,TPA 组加样后24 h 有3个基因出现上调,分别为 Vegfa,Il1 rl1和 Pik3r5;加样后48 h 有11个基因出现上调,分别为 Chek1,Hells,Mc m3,Rad51 ap1,Vegfa,Il1 rl1,Prl2c3,Slc2a1,Tfrc,St mn1和 Rif1;加样后72 h 有10个基因出现上调,分别是 Chek1,Hells,Rad51 ap1,Vegfa,Il1 rl1,Prl2c3,Slc2a1,Tfrc,St mn1和Ccnb1。结论TPA 处理后所选取的22个促长阶段相关基因的表达在不同时间点呈现出不同的敏感性,说明22个肿瘤促长基因与 Bhas42细胞体系结合,有望成为一种更快捷高速的致癌性筛选方法。