【摘 要】
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目的构建促红细胞生成素（EPO）表达质粒,并在人近端肾小管上皮细胞中稳定表达。方法应用标准分子克隆技术构建EPO真核表达载体pcDNA3.1（-）-hEPO。磷酸钙法转染人肾小管近端上皮细
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目的构建促红细胞生成素（EPO）表达质粒,并在人近端肾小管上皮细胞中稳定表达。方法应用标准分子克隆技术构建EPO真核表达载体pcDNA3.1（-）-hEPO。磷酸钙法转染人肾小管近端上皮细胞（HK-2）。酶联免疫吸附法（ELISA）检测培养液上清中的EPO含量。MTT法绘制备组细胞生长曲线。结果构建获得EPO基因的表达质粒,并成功转染肾小管上皮细胞,后者经G418筛选,稳定表达EPO。转染后第21天,其表达量为同期转染的293细胞的（35.0±5.3）%。转染后HK-2细胞生长曲线未见明显改变。
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