苏云金芽孢杆菌cry1Aa10杀虫晶体蛋白基因的克隆、序列分析以及在大肠杆菌中的表达

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本研究从对鳞翅目昆虫有强毒性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis Bt)菌株kurstaki HD-1-02中克隆到一个3.5 kb的杀虫晶体蛋白基因cryI-02 .全序列分析表明,该基因由3 531 bp的核苷酸组成,可编码1176个氨基酸组成的蛋白质.根据同源性比较,该基因被确定为cry1Aa基因.它与国外报道的Btcry1Aa基因具有相似的限制性内切酶图谱,核苷酸和氨基酸序列同源性皆高达99 % .构建了cryI-02的原核表达载体并转化大肠杆菌得到转化体pBBt4/DH5α.SDS-PAGE电泳表明此基因在大肠杆菌中表达了分子量为135 kD的晶体蛋白.该产物对棉铃虫等鳞翅目害虫有强毒杀活性.基因序列已登入GenBank,并被国际命名委员会正式命名为cry1Aa10 .
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