探讨单核细胞微小RNA(miR)-155/miR-21对急性期川崎病TLR4表达的可能影响。
方法选取急性期川崎病患儿45例。根据是否合并冠状动脉损伤分为冠状动脉损伤(KD-CAL+)组16例，无冠状动脉损伤(KD-CAL-)组29例。同年龄组健康体检儿童20名为健康对照(Ctrl)组。流式细胞术检测单核细胞TLR4蛋白表达水平，CD14+免疫磁珠分选单核细胞，实时PCR检测单核细胞miR-155、miR-21表达并检测IL-10、IL-6、IL-1β、TNF-α等mRNA表达水平。ELISA检测MMP-9、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、热休克蛋白(HSP) 60血浓度。采用t检验比较2组间差异。
结果①急性期川崎病患儿单核细胞TLR4表达明显高于对照组[(12.4±5.1)％与(4.6±1.6)%，t=5.55，P<0.05]，KD-CAL＋组TLR4表达明显高于KD-CAL-组[(17.1±4.6)％与(9.6±2.7)%，t=5.89，P<0.05]；②急性期川崎病患儿HMGB1 [(10.2±7.6)ng/ml与(3.2±1.0)ng/ml，t=3.55，P<0.05]及HSP60 [(56±23)ng/ml与(18±7)ng/ml，t=4.90，P<0.05]血浓度水平高于对照组，静脉注射丙种球蛋白(IVIG)治疗后二者血浓度明显下降(P<0.05)；③急性期川崎病患儿单核细胞miR-155[(2.1±2.7)×10-2与(4.6±3.1)×10-3，t=2.57，P<0.05]及miR-21表达(11.6±4.0与8.7±2.2，t=2.78，P<0.05)明显高于对照组，KD-CAL＋组miR-155表达明显高于KD-CAL-组[(4.2±3.0)×10-2与(11.0±1.5)×10-4，t=4.07，P<0.05]，miR-21表达明显低于KD-CAL-组(8.8±2.5与12.8±4.0，t=3.46，P< 0.05)；④急性期川崎病患儿单核细胞IL-10 mRNA表达高于对照组[(34.9±17.5)×10-4与(1.0±9.4)×10-4，t= 5.62，P<0.05]，KD-CAL+组IL-10 mRNA表达明显低于KD-CAL-组[(26.6±13.4)×10-4与(39.5±1.8)×10-4，t= 2.36，P<0.05]；⑤急性期川崎病患儿TNF-α、IL-6、IL-1β等mRNA表达明显高于对照组(P<0.05)，且KD-CAL+组明显高于KD-CAL-组(P<0.05)；⑥急性期川崎病患儿血浆MMP-9浓度高于对照组[(1 141±541) pg/ml与(304±94)pg/ml，t=4.83，P<0.05]，KD-CAL＋组MMP-9血浓度明显高于KD-CAL-组[(1 350±625) pg/ml与(945±370)pg/ml，t=2.21，P<0.05]。
结论miR-155过表达，miR-21表达相对不足导致的miR-155/miR-21调控失衡可能是急性期川崎病TLR4异常表达的原因之一，HMGB1、HSP60等内源性配体浓度持续增高也可能参与触发或放大TLR4表达。