【摘 要】
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目的：构建人肠三叶因子（hITF／hTFF3）酵母双杂交诱饵载体并鉴定其自激活作用。方法：从人结肠黏膜提取总RNA．RT-PCR制备总cDNA，PCR扩增hTFF3基因，TA克隆至pGEMT载体并测序鉴定。经Nco I
【机 构】
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厦门大学附属中山医院消化内科厦门大学消化疾病研究所厦门市消化疾病中心
【基金项目】
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基金项目：福建省自然科学基金资助项目（No.2006J0380）,福建省卫生厅青年科研基金资助（No.2004-2-6）和（No.2006-1-53）
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目的：构建人肠三叶因子（hITF／hTFF3）酵母双杂交诱饵载体并鉴定其自激活作用。方法：从人结肠黏膜提取总RNA．RT-PCR制备总cDNA，PCR扩增hTFF3基因，TA克隆至pGEMT载体并测序鉴定。经Nco I/Xho I双酶切，连接到pENTR11质粒构建入门克隆。LR反应获得酵母双杂交诱饵载体pDEST32-hTFF3，测序正确后与酵母双杂交空猎物载体pDEST22共同转化Mav203酵母细胞，SD／-Leu／-Trp固体培养基上生长，挑取单克隆划线接种到分别含有不同浓度氨基三唑（3AT）的s
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