【摘 要】
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优化肝素裂解酶Ⅰ在大肠杆菌E.coli BL21( DE3 )/pOFX-T7-SL1中的重组表达条件,结果显示接种6h(OD600≈2.5)后加入0.25 mmol/L IPTG,在25℃下表达8h目标蛋白酶活达到最高值1.
【机 构】
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浙江大学化学工程与生物工程学系,浙江杭州,310027
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优化肝素裂解酶Ⅰ在大肠杆菌E.coli BL21( DE3 )/pOFX-T7-SL1中的重组表达条件,结果显示接种6h(OD600≈2.5)后加入0.25 mmol/L IPTG,在25℃下表达8h目标蛋白酶活达到最高值1.49×105 IU/L.进一步于5L发酵罐中扩大培养,20 h后最高酶活达到5.55×105 IU/L.利用亲和层析分离目标蛋白,肝素裂解酶Ⅰ的纯度可达到96％,回收率为37.58％,比酶活达到1.12×103 IU/mg.肝素裂解酶Ⅰ的高效表达为大规模利用酶法制备低分子肝素打下了坚实的基础.
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