【摘 要】
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目的采用低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀(FractionⅣ,FⅣ)中提取α1-抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin,α1-AT),制备较高纯度的α1-AT制剂。方法 FⅣ沉淀经过滤、ConA Sephar
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目的采用低温乙醇法分离正常人血浆组分Ⅳ沉淀(FractionⅣ,FⅣ)中提取α1-抗胰蛋白酶(α1-Antitrypsin,α1-AT),制备较高纯度的α1-AT制剂。方法 FⅣ沉淀经过滤、ConA Sepharose 4B亲和层析、DEAE Sepharose Fast Flow一步离子交换层析提纯α1-AT,采用SDS-PAGE及区带扫描法分析纯化α1-AT的纯度;紫外分光光度计测定纯化α1-AT蛋白的浓度及回收率;Western blot检测其反应原性;胰蛋白酶抑制实验(TICT)检测纯化α1-AT的活性。结果纯化α1-AT的纯度为97.3%;纯化过程中α1-AT蛋白的平均回收率为20.4%;纯化的α1-AT能与抗人α1-AT抗体特异性结合;平均比活为0.833 PU/mg。结论 从FⅣ中成功纯化获得了纯度较高、具有生物学活性的α1-AT制剂。
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