目的：调查某三级综合医院全院医生与护士多重耐药菌（MDRO,multidrug-resistant organism）感染防控知识掌握现状，提高MDRO防控依从性。方法：采用方便抽样法，应用自行设计的MDRO防控评估调查问卷，将调查二维码发送至该院感控群，填写时间期限为一周，分析MDRO防控现状并收集建议，应用Logistic回归分析影响因素并利用受试者工作特征曲线（ROC,receiver operating characteristic curve）评价模型。结果：研究回收问卷954份，经过筛选后剩余933份，护士占79.74%，医生占20.26%；本次调查平均成绩为（70.51±24.63）分，≥80分者占34.94%，护士的及格率（χ~2=26.337,P＜0.001）高于医生；Logistic回归分析显示，专业背景、科室和工作年限均为是否及格的影响因素（均P ＜0.05）,ROC曲线下面积为0.643；问卷结果显示目前获取MDRO知识以与同事交流为主要方式，占84.75%;MDRO消毒不到位以缺乏具体的操作流程图为主要原因，占73.98%。调查共收集建议267条，其中加强培训学习所占比例最高达18.35%；重新设计醒目标识比例达15.36%，尤其提到标识应能够区分不同种类MDRO细菌等。结论：需加强临床医生和低年资医护人员，尤其是医技人员及工作年限≤5年者MDRO防控知信行方面的培训及考核。通过采取将患者MDRO信息加入转接单和检查单，以便于科室之间互通信息，重新设计醒目隔离标识和MDRO防控标准流程图等防控措施，降低MDRO检出率和感染率。