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目的建立一种快速、灵敏、准确的高效液相色谱法测定替硝唑葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛(S-HMF)的含量。方法HPLC法,以Hypersil ODS2 C18(4.6mm×250mm,5pm)为色谱柱,流动相:甲醇:水:冰乙酸(38:62:0.8),柱温:30℃;流速1.0ml/min,检测波长为284nm。结果5-羟甲基糠醛在0.5~2.5μg/ml浓度范围与峰面积有良好线性关系,r=1.000。平均回收率为101.1%,RSD=1%(n=9)。结论本方法准确、简便、快捷。排除了替硝唑的干扰,可