研究局部移植高表达白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)的B淋巴细胞群对小鼠牙周炎症组织中CD4+T淋巴细胞的影响。
方法将24只雌性7周龄C57 BL/6小鼠从1~24号编号后每隔4个数抽取1只作为健康对照组(HC组,6只),剩余小鼠在结扎联合牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)感染后再每隔4个数抽取出:结扎联合Pg感染组(P组,6只)、结扎联合Pg感染局部移植未刺激B细胞(non-stimulate B cell,NSB)组(P+NSB组,6只)、结扎联合Pg感染局部移植刺激后高表达IL-10的B细胞(stimulate B cell,SB)组(P+SB组,6只)。本实验采用丝线联合Pg感染小鼠上颌第二磨牙建立小鼠牙周炎模型,并在结扎后第5天向相应组别局部移植外源性NSB或SB,并在结扎后第14天处死各组小鼠,采用HE染色检测牙周组织病理状态,甲苯胺蓝染色检测牙槽骨吸收情况,免疫荧光检测小鼠CD4+T细胞及IL-10表达情况,免疫组织化学法检测核因子κ B受体活化因子配体(receptor activator of NF-κ B ligand,RANKL)、白细胞介素1β(interleukin -1β,IL-1β)的表达情况。
结果HE染色结果显示:相较于HC组,其余3组小鼠均出现牙龈上皮增生,牙槽骨高度及宽度均减小;甲苯胺蓝染色显示各组小鼠上颌第二磨牙腭侧多边形区域面积:相较于HC组[(0.336±0.029)mm2],P组[(0.668±0.041)mm2]、P+NSB组[(0.750±0.039)mm2]及P+SB组[(0.517±0.038)mm2]小鼠牙槽骨吸收均更显著(F=146.051,P<0.01),且P+NSB组较P组牙槽骨吸收更显著(F=146.051,P<0.01),相较于P组和P+NSB组,P+SB组牙槽骨吸收显著减少(F=146.051,P<0.01)。免疫荧光检测显示,CD4+T细胞在P、P+NSB及P+SB组的表达量均显著高于HC组(F=71.284,P<0.01),但P+SB组CD4+T细胞浸润量显著低于P组及P+NSB组(F=71.284,P<0.01);IL-10表达情况,与HC组相比,其他3组牙龈组织中IL-10阳性细胞均显著升高(F=98.516,P<0.01),且P+SB组IL-10阳性细胞数显著高于P组及P+NSB组(F=98.516,P<0.01)。免疫组织化学染色结果显示,与HC组相比,其他3组牙龈组织中RANKL表达均显著升高(F=154.886,P<0.01),相较于P组和P+NSB组,P+SB组RANKL表达显著下降(F=154.886,P<0.01);P组、P+NSB组及P+SB组IL-1β表达均较HC组显著升高(F=221.185,P<0.01),且P+NSB组较P组显著升高(F=221.185,P<0.01),P+SB组较P组和P+NSB组显著减少(F=221.185,P<0.01)。
结论局部移植高表达IL-10的淋巴细胞群能抑制牙槽骨吸收、CD4+T细胞浸润、RANKL及IL-1β表达,其机制可能是上调牙周组织中IL-10的表达。