刚地弓形虫抗原基因SAG2的克隆、表达和纯化

来源 :中国兽医寄生虫病 | 被引量 : 0次 | 上传用户:csutouyang
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目的 克隆刚地弓形虫抗原基因SAG2,并在大肠杆菌中进行高效表达及纯化。方法 设计引物从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因序列,构建pGEX4T-SAG2重组质粒,双酶切鉴定后,在大肠杆菌中进行表达,并对其表达条件进行优化,所表达蛋白用GST亲和层析柱进行纯化。结果 经SDS-PAGE检测,所表达的蛋白约为41KD。Western-blotting表明该蛋白能与兔抗弓形虫血清特异性结合。培养基2×YTA,IPTG浓度0.1mmol/L,诱导时间3h,培养温度30℃,摇瓶转速220r/min是G
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