【摘 要】
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目的观察和探讨鞘内注射miR-125b mimic对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)后小胶质细胞活化和神经炎症反应的影响及机制。方法120只SD大鼠随机分为4组：假手术组(Sham组，鞘内注射生理盐水)、损伤组(IR组，鞘内注射生理盐水)、mimic组(IR+鞘内注射miR-125b mimic)和control组(IR+鞘内注射miR-125b control)。Sham组仅开胸暴露主动脉弓
【机 构】
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中国医科大学附属第一医院麻醉科，沈阳 110001,中国医科大学附属第一医院麻醉科，沈阳 110001,中国医科大学附属第一医院麻醉科，沈阳 110001,
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目的观察和探讨鞘内注射miR-125b mimic对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)后小胶质细胞活化和神经炎症反应的影响及机制。
方法120只SD大鼠随机分为4组：假手术组(Sham组，鞘内注射生理盐水)、损伤组(IR组，鞘内注射生理盐水)、mimic组(IR+鞘内注射miR-125b mimic)和control组(IR+鞘内注射miR-125b control)。Sham组仅开胸暴露主动脉弓而不夹闭，其余各组使用动脉夹夹闭主动脉弓14 min，再移除动脉夹制备SCIRI模型。各组大鼠术前给予连续3 d鞘内注射，每天1次。Iba-1作为小胶质细胞特异性标记物，损伤后48 h采用免疫荧光法观察小胶质细胞的形态并计数活化的细胞数量；双免疫荧光观察Iba-1和NOD样受体pyrin结构域含3(NLRP3)在细胞的分布。Western blot法测定脊髓组织中Iba-1、NLRP3、cleaved caspase-1蛋白含量；ELISA法测定炎症因子IL-1β含量。
结果损伤后48 h，Sham组脊髓背角内小胶质细胞多为分支样形态，未见高Iba-1荧光信号表达；IR组和control组可见大量小胶质细胞形态为变形虫样，且高Iba-1荧光信号的细胞数量明显增加；而mimic组中小胶质细胞形态为分支样和变形虫样混杂，高Iba-1荧光信号的细胞数量较IR组明显降低(P<0.05)。双免疫荧光法显示NLRP3主要分布于高Iba-1荧光信号的小胶质细胞上。与Sham组相比，IR组脊髓组织中Iba-1、NLRP3、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白表达均明显增加(P<0.05)。与IR组相比，mimic组明显降低脊髓中Iba-1、NLRP3、cleaved caspase-1和IL-1β蛋白表达(P<0.05)。而control组与IR组的上述指标差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论鞘内注射miR-125b mimic通过抑制SCIRI引起的小胶质细胞活化，进而减少脊髓组织中NLRP3炎症体表达，发挥有效的抗炎作用。
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