【摘 要】
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目的 探究15Hz正弦波电磁场体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨方向分化的最佳时间窗.方法 体外分离培养SD大鼠BMSCs,将长势良好的第三代细胞,按照1×105个/孔接种细胞
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科
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目的 探究15Hz正弦波电磁场体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨方向分化的最佳时间窗.方法 体外分离培养SD大鼠BMSCs,将长势良好的第三代细胞,按照1×105个/孔接种细胞于3.5cm细胞培养皿中,接种后第2天将所有培养皿编号.按随机数字表法随机分为对照组和暴磁组,再按暴磁总天数分为A组(7d)、B组(14d)、C组(28d),A组包括A0组(对照组)、A1组(暴磁每日1h)、A2组(暴磁每日4h)、A3组(暴磁每日8h)；B组包括B0组(对照组)、B1组(暴磁每日1h)、B2组(暴磁每日4h)、B3组(暴磁每日8h)；C组包括C0组(对照组)、C1组(暴磁每日1h)、C2组(暴磁每日4h)、C3组(暴磁每日8h).每批次细胞取自同一只老鼠,暴磁组置于15Hz1mT正弦波电磁场中暴磁.用荧光定量PCR方法检测各组Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨唾液酸蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)基因表达量的变化；用茜素红染色方法比较各组钙结节分布；用蛋白印迹法(Western blot)检测比较各组RUNX2蛋白量的变化.结果 15Hz正弦波电磁场刺激7d可以体外诱导大鼠BMSCs向成骨方向分化,以A2组的效应最为明显,并且以早期成骨指标RUNX2的效应最为突出；磁场刺激14d后,则以B1组效用明显,并且以晚期成骨指标OPN的效应明显.Westem Blot比较各组RUNX2蛋白量的变化,趋势相近.电磁场刺激14d和28d后,以B1组和C1组的钙结节量最多.结论 15Hz正弦波电磁场诱导BMSCs成骨分化有明显的时间窗口效应；随着暴磁天数的增加,每天短时间(1h)暴磁即可达到较好的诱导效果.
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