【摘 要】
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以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S.bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织,经PPT抗性筛选后分化再生植株
【机 构】
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解放军军需大学植物基因工程研究中心,解放军军需大学植物基因工程研究中心
【基金项目】
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国家转基因植物研究和产业化专项基金
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以杂交育种中广泛使用的优良玉米自交系340、4112为材料,用带有质粒pGBIL04(actin.Bt.35S.bar)的根癌农杆菌LBA4404转化其幼胚及其初始愈伤组织,经PPT抗性筛选后分化再生植株.PCR分子检测初步证明Bt基因已整合到再生植株基因组中,转化率为1.68%～4.44%.本实验利用转化受体的抗性筛选频率对转化体系进行了优化,结果表明:比较适宜的感染液浓度为OD600=0.5;预培养有利于幼胚转化,预培养时间以刚刚诱导出新鲜稳定的初始愈伤为宜;适当降低共培养温度到22℃可以提高农杆菌介
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