【摘 要】
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目的 建立尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁的同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱的快速测定方法.方法 离心后的尿样上清液加入15N5-8-羟基脱氧鸟苷、D3-可替宁两种内标,以3 mmol/
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院/四川大学华西第四医院卫生检验与检疫系,成都,610041
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目的 建立尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁的同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱的快速测定方法.方法 离心后的尿样上清液加入15N5-8-羟基脱氧鸟苷、D3-可替宁两种内标,以3 mmol/L甲酸铵水溶液稀释5倍,经0.22μm水系滤器过滤后,引入液相色谱-串联质谱法(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)分析.以ACQUITY UPLC(R) BEH HILIC色谱柱(50 mm×3.0 mm,1.7 μm)分离,3 mmol/L甲酸铵水溶液与乙腈为流动相(10∶90)等度洗脱,柱温40℃,流速0.3 mL/min;质谱以电喷雾电离源(electrospray ionization,ESI)+扫描多反应监测模式检测,内标法定量.结果 8-羟基脱氧鸟苷和可替宁在各自线性范围内线性良好,方法检出限分别为0.064 μg/L和0.035μg/L;定量限分别为0.21 μg/L和0.12 μg/L;加标回收率分别为92.6％～ 102.0％和102.0％～ 106.0％.采用所建立的方法测定实际尿样,并通过40例样本统计分析发现,主、被动吸烟者的烟草烟气暴露量、烟草特有亚硝胺摄入量存在差异(P＜0.05),NNAL和可替宁含量在主动吸烟者尿样中含量更高;主、被动吸烟者的烟草烟气暴露与烟草特有亚硝胺暴露呈正相关(其相关系数r分别为0.487和0.786,P＜0.05).结论 本研究成功建立同时测定尿液中8-羟基脱氧鸟苷和可替宁含量的同位素稀释-亲水作用色谱串联质谱法,该方法前处理简单、快速,通过同位素内标校正,定量灵敏准确,能够满足批量分析的需求.
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