【摘 要】
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目的构建正常恒河猴的肝脏组织cDNA表达文库,以筛选恒河猴的相关基因并提供其作为医学研究动物模型的遗传学依据。方法提取正常恒河猴肝脏组织总RNA,纯化的mRNA反转录合成cDN
【机 构】
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重庆医科大学公共卫生学院生殖生理教研室,四川大学华西医院移植免疫实验室,四川大学华西医院国家成都中药安全性评价中心
【基金项目】
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四川省科技厅平台建设项目(川财教E2004316)、教育部长江学者和创新团队发展计划(IRT0450)部分资助
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目的构建正常恒河猴的肝脏组织cDNA表达文库,以筛选恒河猴的相关基因并提供其作为医学研究动物模型的遗传学依据。方法提取正常恒河猴肝脏组织总RNA,纯化的mRNA反转录合成cDNA,连接EcoR接头,经Xho酶切并用CHROMA SPIN-400分离cDNA,将大于500bp的cDNA片段连接于λZAP表达载体,体外包装后转染至XL1-BlueMRF’宿主菌中,再扩增文库。对cDNA文库的滴度、重组率和插入片段的大小进行检测。结果初始文库的库容量为1.2×10^6pfu,初始文库和扩增文库的滴度分
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