单环刺螠转录因子基因Sp8的克隆、原核表达和重组蛋白纯化

来源 :中国海洋大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhujunhong778

【摘要】

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转录因子Sp是一类广泛存在的锌指蛋白超家族成员，可与某些基因的上游调控序列结合，参与基因的转录调控。本研究采用同源克隆和RACE技术，获得单环刺蜢的Sp8的全长cDNA，该序列长191

【作者】

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史晓丽刘晓龙张立涛张志峰

【机构】

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中国海洋大学海洋生物遗传育种教育部重点实验室

【出处】

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中国海洋大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2013年5期

【关键词】

：

单环刺螠 Sp8 转录因子克隆原核表达 Urechis unicinctus Specificity protein 8 transcription fac

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（31072191）资助

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转录因子Sp是一类广泛存在的锌指蛋白超家族成员，可与某些基因的上游调控序列结合，参与基因的转录调控。本研究采用同源克隆和RACE技术，获得单环刺蜢的Sp8的全长cDNA，该序列长1913bp，开放阅读框1521bp，编码506个氨基酸；将其开放阅读框cDNA克隆到原核表达载体pET28a中，并转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，在37℃条件下，经1mmol／LIPTG诱导表达4h，获得以包涵体形式存在的重组蛋白pET28a-SP，使用8mol／L尿素溶解包涵体，并通过镍离子金属螯合柱纯化获得重组蛋白

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