【摘 要】
：
目的 利用两种昆虫杆状病毒表达系统表达甲型H1N1血凝素(haemegglutinin,HA)蛋白,进而获得具有牛物学活性的目的 蛋白.方法 选取中国内地第1例2009甲型H1N1确诊病例病毒株A/S
【机 构】
：
中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系
论文部分内容阅读
目的 利用两种昆虫杆状病毒表达系统表达甲型H1N1血凝素(haemegglutinin,HA)蛋白,进而获得具有牛物学活性的目的 蛋白.方法 选取中国内地第1例2009甲型H1N1确诊病例病毒株A/Sichuan/1/2009(1-11N1),人工合成完整HA基因序列;分别利用杆状病毒表达系统BaculoGold system和Bac-to-Bac system,在昆虫细胞中表达目的 基因HA;经亲和层析纯化及Western blot鉴定,红细胞血凝试验检测HA蛋白的生物学活性.结果 获得测序正确的HA基因,分别克隆到pAcGP67B(BaculoGold system)和pFAST Bacl(Bac-to-Bac system)载体,经杆状病毒同源重组后转染Sf9细胞,Western blot鉴定显示,BaculoGold system表达HA蛋白是分泌型的,而Bac-to-Bac system是胞内表达肚表达效果优于前者;血凝试验证实,这两种表达系统表达的HA蛋白均具有生物学活性.结论 利用杆状病毒表达系统成功表达出具有生物学活性的HA蛋白,Bac-to-Bac system更适合表达HA蛋白,为流感病毒的相关研究提供了保障.
其他文献
用RT-PCR法和3′、5′RACE(Rapid amplification of cDNA ends)法从淇河鲫脑垂体RNA克隆出生长激素(Growth hormone,GH) cDNA.此cDNA全长1 191 nt(含Poly(A)14 nt),其5′端非
本文描述的生产管理系统是基于电力设施中通信光缆建设维护的管理系统。它利用移动信息化技术实现了从手机现场数据采集到后台数据分析查询的高效工作模式，对安全生产管理和现
目的探讨体外培养诱导慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞(DCs)功能状态改善的方法。方法用GM-CSF+IL-4+INF-α诱生慢性乙型肝炎患者及健康人外周血来源的DCs,在乙肝患者DCs成
目的 明确中国Rett综合征(Rett syndrome,RTT)患儿致病基因甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,MECP2)的突变亲源.方法 对115例经基因突变分析证实存在MECP2突
利用我国现有尾矿库溃坝事故统计资料,对事故发生趋势进行了分析,并从概率分析角度出发,基于贝叶斯估计方法对我国尾矿库溃坝事故风险进行定量分析,建立了尾矿库溃坝事故发生
矿山机械设备不仅是矿山企业重要的固定资产，更是矿山作业生产过程中不可或缺的重要帮手。鉴于此，本文对矿山机械设备的使用与维修进行了分析探讨。
应用量子化学从头算HF/3-21G方法,在全局优化中确定贻贝黏附蛋白的强力粘附单元DOPA二联体的几何构型、各原子电荷分布及热力学参数.计算表明:DOPA二联体易与HClO发生亲电取
为研究高温条件下膨润土阻滞放射性核素迁移机制, 以内蒙古高庙子膨润土为原料, Nd3+模拟Am3+, 采用高温固态反应方法开展模拟实验. 利用X射线荧光、热分析和X射线衍射对内蒙
目的 根据大鼠背根神经节(DRG)神经元所记录的天然H+-门控离子通道电流特征将其进行分型,并探讨各型天然H+-门控离子通道与其基因型组成的酸敏感离子通道(ASICS)亚基间的相关