【摘 要】
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目的优化四价流感裂解疫苗中H1N1（IVR-180）、H3N2（IVR-186）、BV（NYMC BX-69A）、BY（B/Phuket/3073/2013）亚型疫苗株在MDCK细胞中的增殖条件。方法以血凝滴度和半数组织感染剂量(median
【机 构】
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武汉生物制品研究所有限责任公司; 国家联合疫苗工程技术研究中心; 中国生物技术股份有限公司;
【基金项目】
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“重大新药创制”科技重大专项（2016ZX09106003-008）
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目的优化四价流感裂解疫苗中H1N1（IVR-180）、H3N2（IVR-186）、BV（NYMC BX-69A）、BY（B/Phuket/3073/2013）亚型疫苗株在MDCK细胞中的增殖条件。方法以血凝滴度和半数组织感染剂量(median tissue culture infective dose,TCID50)为指标,通过棋盘法对4种亚型流感病毒疫苗株在MDCK细胞上种毒的MOI（0.1、0.01、0.001、0.000 1）、TPCK胰酶终浓度（0.5、1、1.5、2、3、4μg/mL）及收毒时间（0、24、48、72、96 h）进行优化,并检测各条件下MDCK细胞的葡萄糖和乳酸代谢情况。结果 H1N1（IVR-180）、H3N2（IVR-186）、BV（NYMC BX-69A）、BY（B/Phuket/3073/2013）4种亚型流感病毒疫苗株的最适MOI分别为0.000 1、0.001、0.000 1和0.001,TPCK胰酶终浓度分别为1、2、1和2μg/mL,收毒时间分别为72、48、48和48 h。各条件下MDCK细胞的葡萄糖和乳酸代谢水平呈整体上升趋势。结论成功优化了4种亚型流感病毒疫苗株在MDCK细胞上的增殖条件,为以MDCK细胞为基质流感疫苗的研发奠定了基础。
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