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为高效制备棉籽多肽,采用Alcalase酶和Flavourzyme酶对棉籽蛋白进行双酶分步水解。在前期单因素试验的基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其多肽得率的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素,然后通过三因素三水平的Box-Behnken响应面分析法确定双酶分步水解棉籽蛋白的最优操作条件为:底物浓度(w/v)8.36%,先用Alcalase酶在温度59.9℃、pH值8.0、酶用量25 000 U/g的条件下水解150 min,再用Flavourzyme酶在温度50℃、pH