【摘 要】
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二脂酰甘油酰基转移酶（Diacylglycerol acyltransferase,DGAT）是催化三脂酰甘油（TAG）合成途径的关键酶，在植物生长发育和逆境胁迫响应中具有重要的作用。本研究从普通烟草品种K326中克隆得到NtDGAT3基因，利用荧光定量PCR技术分析不同组织中和低温胁迫下NtDGAT3的表达规律。同时，利用CRISPR/Cas9技术制作NtDGAT3敲除植株，对其耐冷性进行了分析
【基金项目】
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中国烟草总公司重大专项项目（110202001029 JY-12、110202101001 JY-01）； 湖北省烟草公司科技项目（027Y2020-014）；
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二脂酰甘油酰基转移酶（Diacylglycerol acyltransferase,DGAT）是催化三脂酰甘油（TAG）合成途径的关键酶，在植物生长发育和逆境胁迫响应中具有重要的作用。本研究从普通烟草品种K326中克隆得到NtDGAT3基因，利用荧光定量PCR技术分析不同组织中和低温胁迫下NtDGAT3的表达规律。同时，利用CRISPR/Cas9技术制作NtDGAT3敲除植株，对其耐冷性进行了分析。结果表明，NtDGAT3在烟草根、茎、叶中均有表达，且叶部表达量最高；NtDGAT3受冷胁迫强烈诱导，说明该基因可能对冷胁迫有响应。低温处理试验结果表明，敲除突变体ntdgat3对冷敏感，突变体叶片离子渗漏率及丙二醛含量的变化幅度显著高于野生型烟草；在ntdgat3中，膜脂代谢关键基因PLDα1的表达水平显著高于野生型烟草，而PLDδ的表达水平显著低于野生型烟草。以上结果表明，NtDGAT3基因通过PLDα1和PLDδ的表达参与调节植物低温响应。
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