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目的
观察沉默周期蛋白G1(Cyclin G1)基因对肺癌细胞A549增殖及凋亡的影响。
方法采用脂质体转染法转染Cyclin G1 siRNA至A549细胞中,使用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测A549细胞中Cyclin G1 mRNA表达,Western blot法检测A549细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc、Cyclin G1蛋白的表达。噻唑蓝(MTT)法检测转染48 h后A549细胞的增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率的变化。
结果转染48 h后干扰组中细胞的吸光度(A)值、Cyclin G1 mRNA和β-catenin、c-Myc、Cyclin G1蛋白的相对表达水平均显著降低,与对照组比较,差异均有统计学意义(t=14.250,P=0.000;t=10.739,P=0.000);与对照组比较,干扰组中G0/G1期细胞所占比例和细胞凋亡率均明显升高,而S期和G2/M期细胞比例明显下降,差异均具有统计学意义(t=5.074,P=0.007;t=4.634,P=0.010;t=3.099,P=0.000)。
结论沉默Cyclin G1基因能够抑制肺癌细胞增殖,诱导其凋亡,其作用机制可能与阻滞细胞G0/G1期和下调Wnt信号通路中β-catenin、c-Myc蛋白有关。