【摘 要】
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目的通过下调α5-烟碱型乙酰胆碱受体(α5-nAChR)的表达,体外研究尼古丁促肺癌细胞增殖过程中α5-nAChR对缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法以不同浓度尼古丁作用人肺腺
【机 构】
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山东大学附属济南市中心医院中心实验室; 山东省肿瘤防治靶向分子研究重点实验室; 山东省警官总医院血液净化科;
【基金项目】
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国家自然基金面上项目(81272588);山东省自然科学基金(ZR2012HM061);山东省高等学校科技计划(J11LC14);国家重点基础研究发展计划(973计划)(2012CB966503-4)
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目的通过下调α5-烟碱型乙酰胆碱受体(α5-nAChR)的表达,体外研究尼古丁促肺癌细胞增殖过程中α5-nAChR对缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法以不同浓度尼古丁作用人肺腺癌细胞株A549,分别采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测A549细胞中α5-nAChR、HIF-1αmRNA和蛋白的表达。MTT法、实时荧光定量PCR、Western blotting检测CHRNA5-siRNA转染后,尼古丁促A549细胞增殖的作用和HIF-1α表达的变化。结果尼古丁浓度为1μmol/L时,α5-nAChR和HIF-1α表达明显升高(P<0.05),二者表达呈尼古丁浓度依赖性。CHRNA5-siRNA转染显著抑制α5-nAChR、HIF-1α表达(P<0.05),尼古丁促A549细胞增殖的作用明显受到抑制(P<0.05)。结论α5-nAchR通过调节HIF-1α的表达,在尼古丁促肺癌细胞增殖中起作用,提示α5-nAChR/HIF-1α信号轴可能是吸烟相关性肺癌发生的重要分子机制之一。
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