目的 建立超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法测定天麻中天麻素、对羟基苯甲醇和巴利森苷等活性成分.方法 天麻经超声波提取60 min,离心、稀释,过0.22μm滤膜后直接进样测定,以0.1％甲酸-乙腈(A)及0.1％甲酸-水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.5 mL/min,在A CQUITY UPLC? HSS T3色谱柱上实现分离,电喷雾离子源(ESI)负离子多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量.结果 天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.999 0);检出限为0.08～63.20 μg/L,定量限为0.26～196.70μg/L,平均加标回收率为94.51％-106.70％,相对标准偏差为1.69％～3.91％.检测结果显示,天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C和巴利森苷E含量分别为(3.44±1.15)mg/g、(0.77±0.74)mg/g、(10.05±3.64)mg/g,(6.59±1.64)mg/g、(1.02±0.31)mg/g和(5.79±1.47)mg/g.只考虑天麻素和对羟基苯甲醇总含量,为(4.22±1.07)mg/g.结论 建立的超高效液相色谱-三重四级杆质谱法前处理过程简单,该方法快速、准确,能满足天麻中6种活性成分定性、定量检测要求.