【摘 要】
：
目的:探讨肾复康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠成纤维细胞转分化模型的抑制作用及机制.方法:采用噻唑兰(MTT)法检测不同浓度肾复康对NRK-49F细胞增殖的作用;试验随机设置空白对照组、模型对照组,糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)3 mmol/L组、肾复康0.25、0.5、1 g/mL组.试剂盒检测细胞上清乳酸含量;采用实时荧光定量PCR检测α-肌动蛋白(α-Sma)、Ⅰ型胶原(Col1a1)、己糖激酶(hexokinase,Hk)、6-磷酸果糖激酶-2(Pfk-2)和葡萄糖转
【机 构】
：
湖南中医药大学附属中西医结合医院肾脏科,长沙 410000;中南大学湘雅二院肾脏疾病与血液净化湖南省重点实验室,长沙410000
论文部分内容阅读
目的:探讨肾复康对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠成纤维细胞转分化模型的抑制作用及机制.方法:采用噻唑兰(MTT)法检测不同浓度肾复康对NRK-49F细胞增殖的作用;试验随机设置空白对照组、模型对照组,糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)3 mmol/L组、肾复康0.25、0.5、1 g/mL组.试剂盒检测细胞上清乳酸含量;采用实时荧光定量PCR检测α-肌动蛋白(α-Sma)、Ⅰ型胶原(Col1a1)、己糖激酶(hexokinase,Hk)、6-磷酸果糖激酶-2(Pfk-2)和葡萄糖转运蛋白4(Glut4) mRNA表达水平;免疫荧光检测α-SMA的蛋白表达水平;Western Blot法检测HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平.结果:肾复康在0、0.125、0.25、0.5和1 g/mL浓度对NRK-49F细胞增殖无抑制作用;与空白对照组相比,模型对照组乳酸水平显著升高,α-Sma、Col1a1、Hk、聊-2和Glut4 mRNA表达水平显著上调,α-SMA荧光强度增强,HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平显著上调(P＜0.01);与模型对照组相比,2-DG组及肾复康0.5、1g/mL组乳酸水平显著降低,α-S埘a、Col1a1、Hk、Pfk-2和Glut4 mRNA表达水平明显下调(P＜0.05或P＜0.01),α-SMA荧光水平明显减弱,HK、PFK-2和GLUT4蛋白表达水平显著下调(P＜0.05或P＜0.01).结论:肾复康能够抑制成纤维细胞的转分化纤维生成,且其机制可能与抑制糖酵解有关.
其他文献
目的:探讨三叶香茶菜对四氯化碳(CCl4)致肝纤维化大鼠炎症小体3(NOD-like receptor family pyrin domain-contai-ning 3,NLRP3)/半胱天冬酶-1(Caspase-1)/消皮素D(gastermin D,GSDMD)信号通路的作用.方法:采用CCl4致大鼠肝纤维化模型,给予三叶香茶菜治疗后,分别生化检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量.酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清透明质
目的:探究蒙古扁桃油对肺纤维化大鼠的影响.方法:将60只SPF级雄性SD大鼠按体重随机分为6组:正常对照组、模型对照组、醋酸泼尼松0.0015 g/kg组、蒙古扁桃油5、10、15 g/kg组.除正常对照组外,其他各组通过气管内滴注博莱霉素5 mg/kg建立肺纤维化模型,各组连续灌胃相应药物或生理盐水28 d后摘取肺组织用于苏木素-伊红(HE)、马森(Masson)等组织病理学分析及检测肺脏器指数、肺组织白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素.-1β(IL-1β)、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(COL
目的:研究艾片对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠的脑保护作用及机制.方法:采用防治结合给药方式对线栓法制备的脑缺血再灌注模型大鼠进行干预,测量不同时间点(再灌注4h、22.5 h、46.5 h和70.5 h)模型大鼠的体温,观察其体温变化;根据mNss评分法对模型大鼠不同时间点(与体温同步)神经功能进行评价;苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色法观察模型大鼠缺血侧脑组织病理形态;酶联免疫吸附法检测模型大鼠血清中锰-超氧化物歧化酶(Mn-Superoxide dismutase,Mn
目的:探讨黎药鹧鸪茶治疗高脂血症(HLP)作用机制.方法:取SPF级SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、运动组及鹧鸪茶1.7、2.5、3.3 g/kg组,每组10只,除正常对照组外其余各组采用高脂饲料喂养8w建立高脂血症大鼠模型.动物模型建成后,给药组灌胃给予相应药物,正常对照组与模型对照组给予蒸馏水灌胃,运动组予游泳干预治疗.上述干预进行4w后,采集大鼠血液及肝脏组织,检测血脂水平、肝脏氧化应激指标、肝脏组织油红染色并使用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定肝组织中胞浆蛋白伴侣分
目的:研究新鲜唐古特大黄茎对小鼠的急性毒性及泻下作用,为大黄茎的安全性评价和后续毒理药效实验提供参考.方法:以SPF级KM种小鼠为受试对象,测定其最大耐受量.给药后观察小鼠在14d内所产生的毒性反应(死亡、中毒症状)及恢复情况等,同时记录各组动物给药后的体质量变化和摄食饮水情况;14 d后,测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)的水平,称量各组织质量并计算其脏器系数,苏木素-伊红(HE)染色观察各组织脏器的病理学变化
目的:通过网络药理学研究探讨半枝莲抗结直肠癌的作用机制,并通过实验验证相关靶点.方法:借助TCMSP数据库检索半枝莲的化学成分和相关靶点.通过蛋白质数据库Uniprot查询对应的基因名,运用Cytoscape3.6.0构建半枝莲的成分-靶点网络,基于KEGG信号通路和GO富集分析,预测半枝莲抗结直肠癌的作用机制.选取结肠癌细胞HCT116进行MTT、划痕、Tran-swell以及蛋白免疫印迹法验证半枝莲抗结直肠癌的作用机制.结果:检索出半枝莲化学成分主要包括黄芩苷、黄芩黄酮以及槲皮素等;筛选出关键靶基因2
目的:基于特征图谱、网络药理学及分子对接技术,对黄连异喹啉类生物碱成分治疗2型糖尿病(T2DM)的潜在作用机制进行预测分析.方法:利用高效液相色谱法对黄连全株药材不同部位的异喹啉类生物碱成分进行定量测定,建立HPLC特征图谱.借助TCMSP数据库、Swiss Target Prediction数据库及Uniprot数据库筛选和分析黄连目标化合物及作用靶点,通过Genecards、OMIM、TTD和Drugbank数据库筛选出T2DM疾病靶点基因,使用STRING数据库绘制靶点蛋白-靶点蛋白相互作用网络,对
目的:探究甘草次酸拮抗乌头碱致大鼠心律失常的作用机制.方法:将40只大鼠分成正常对照组、模型对照组、胺碘酮56 mg/kg组、甘草次酸50、150 mg/kg组,每组8只,以大鼠Ⅱ导联心电图变化为指标,动态观察用药后大鼠心电图和心率的变化,采用HE染色法评价心肌组织结构的改变,检测大鼠血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、脑钠肽(BNP)和心肌组织中Na+-K+-ATP酶,钙调蛋白(CaM)、钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)水平.结果:与正常对照组比较,模型对照组出现明显心率降低,BNP、LDH
目的:研究中药黄连-大黄药对对自发性2型糖尿病(T2DM) GK大鼠糖脂代谢紊乱调控的影响,并基于肠道菌群探究其治疗T2DM的潜在作用机制.方法:以GK大鼠构建T2DM模型,将造模成功的30只大鼠随机分配为模型对照组、二甲双胍0.1 g/kg组、黄连-大黄药对1.18、2.36、4.72 g/kg组,另设6只正常Wistar大鼠作为正常对照组;采用血糖测试仪检测大鼠随机血糖(RBG)的动态变化;ELISA法检测空腹血清胰岛素(FINS)、内毒素(ET)、白介素1β (IL-1β)、白介素18 (IL-18
目的:探讨降脂通络软胶囊对膜性肾病(MN)大鼠肾脏的干预作用及对足细胞自噬活性的影响.方法:60只SD大鼠随机抽取10只作为正常对照组,其余大鼠复制MN模型,造模成功后随机将大鼠分为模型对照组、盐酸贝那普利10 mg/kg组、降脂通络软胶囊25、50、100 mg/kg组.造模成功大鼠每日灌胃给药,连续给药4w.末次药后检测各组大鼠24h尿蛋白含量(UTP)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平变化,采用HE、PASM染色及电镜观察肾脏病理改变,免