氯喹预处理在高糖环境下对HK-2细胞缺氧复氧损伤中的保护作用及机制

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目的

探讨氯喹预处理在高糖环境下对人肾小管上皮细胞(HK-2)缺氧复氧损伤中的保护作用及机制。

方法

随机将HK-2细胞分为3组(n=6):高糖组(HG组);高糖缺氧复氧组(HH/R组);高糖缺氧复氧+氯喹预处理组(HH/R-CQ组)。采用高糖刺激72 h建立高糖模型,预处理组给予50 μmol氯喹与高糖同时作用72 h预处理,缺氧4 h复氧2 h建立缺氧复氧模型。采用细胞增殖与毒性(CCK-8)和乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞活性,酶联免疫吸附试验法检测细胞内白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫荧光和Western blot法检测肾脏细胞TLR7、MyD88和NF-κB蛋白的表达。采用t检验进行统计学分析。

结果

与HG组相比,HH/R组CCK-8活性下降,LDH、IL-6、TNF-α、细胞凋亡率、TLR7(0.635±0.034比0.857±0.052,t=4.77,P<0.05)、MyD88(0.607±0.029比0.828±0.040,t=5.36,P<0.05)及NF-κB(0.618±0.035比0.854±0.024,t=5.62,P<0.05)表达增多;与HH/R组相比,HH/R-CQ组CCK-8活性上升,LDH、IL-6、TNF-α、细胞凋亡率、TLR7(0.857±0.052比0.642±0.024,t=4.61,P<0.05)、MyD88(0.828±0.040比0.638±0.050,t=4.60,P<0.05)及NF-κB(0.854±0.024比0.605±0.035,t=5.94,P<0.05)表达减少。

结论

氯喹通过抑制TLR7/MyD88信号通路,降低炎症反应,减少细胞凋亡从而减轻缺氧复氧损伤。

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