鲤鱼重组IL-17N的原核表达条件优化及蛋白纯化

来源 :湖南农业大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：along365

【摘要】

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为获得可溶的鲤鱼IL-17N重组蛋白,构建原核重组表达质粒GST-17N、SUMO-GST-17N和MBP-17N,确定IL-17N的最适促溶标签,并优化其诱导表达条件(诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(I

【作者】

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张磊唐永凯李红霞徐逾鑫李迎宾俞菊华

【机构】

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南京农业大学无锡渔业学院,中国水产科学研究院淡水渔业研究中心

【出处】

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湖南农业大学学报:自然科学版

【发表日期】

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2020年3期

【关键词】

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鲤鱼白细胞介素17N 原核表达重组蛋白融合标签蛋白纯化 Cyprinus carpiointerleukin-17Nprokaryotic expres

【基金项目】

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中央级基本科研业务费(2018HY-ZD02)

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为获得可溶的鲤鱼IL-17N重组蛋白,构建原核重组表达质粒GST-17N、SUMO-GST-17N和MBP-17N,确定IL-17N的最适促溶标签,并优化其诱导表达条件(诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)的浓度、诱导时间和诱导温度)。结果:成功构建了鲤鱼IL-17N原核重组表达载体GST-17N、SUMO-GST-17N和MBP-17N;融合标签MBP、SUMO-GST和GST的促溶效果依次降低,SUMO-GST-17N、MBP-17N上清蛋白占总蛋白比例分别为47.4%、87.0%;MBP-

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