【摘 要】
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目的 分析髓鞘转录因子1激酶抗体(PKMYT1)和腺苷同型半胱氨酸水解酶(AHCY)突变对重组人类n-myc原癌基因蛋白(MYCN)基因扩增的几童神经母细胞瘤存活的影响及其参与的调控机制.
【机 构】
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福建省立医院 小几外科,福建 福州,350001
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目的 分析髓鞘转录因子1激酶抗体(PKMYT1)和腺苷同型半胱氨酸水解酶(AHCY)突变对重组人类n-myc原癌基因蛋白(MYCN)基因扩增的几童神经母细胞瘤存活的影响及其参与的调控机制.方法 实验组用CRISPR-Cas9系统实现PKMYT1和AHCY的定点突变,对照组为野生型.用流式细胞术检测实验组和对照组细胞凋亡的能力,用克隆形成实验和异种移植模型验证实验组和对照组细胞存活和增殖能力的能力,用Western blot检测PKMYT1和AHCY突变参与的信号通路.结果 野生型和 C1358T1 的凋亡比例分别为(7.23 ± 0.32)％和(5.71 ± 0.23)％,差异有统计学意义(P＜0.05);野生型和G367A的凋亡比例分别为(9.24 ± 0.54)％和(6.62 ± 0.43)％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PKMYT1突变主要通过激活MYCN扩增的神经母细胞瘤的同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)/雷帕霉素靶蛋白通路(mTOR)通路来抑制细胞的凋亡,而AHCY突变主要是通过激活MYCN扩增的神经母细胞瘤的转化生长因子-β(TGF-β)通路来抑制细胞的凋亡.
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