探讨微小RNA(miRNA,miR)-200a在前列腺癌组织中的表达及与临床参数的相关性,并在体内研究miR-200a对裸鼠移植瘤生长的影响及机制。
方法应用荧光原位杂交(FISH)技术检测2018年1月至2019年8月在徐州医科大学附属医院接受手术切除的54例经病理证实的前列腺癌的组织标本及前列腺增生组织标本中miR-200a的表达,并分析与病理分级、Gleason评分、前列腺特异抗原(PSA)水平、年龄之间的相关性;建立小鼠皮下移植瘤模型(购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司),分3组:转染miR-200a高表达质粒的DU145细胞组、转染表达miR-200a+特异性核基质结合区结合蛋白1(SATB1)的DU145细胞质粒组、未转染的DU145细胞组,取0.2 ml细胞悬液接种于小鼠右后臀部皮下,每隔5 d测量皮下移植瘤体积,绘制裸鼠移植瘤生长曲线,采用χ2检验及t检验,分析3组移植瘤体积的统计学差异;免疫组织化学和蛋白质印迹法(Western blot)法检测移植瘤SATB1的表达变化。多样本间比较采用单因素方差分析,组间比较采用t检验。
结果miR-200a在前列腺癌组织中的阳性率为27.8%(15/54),在前列腺增生组织中的阳性率为90.0%(9/10),差异有统计学意义(χ2=11.409,P<0.05),且前列腺癌组织中miR-200a表达强度与前列腺癌的病理分级和临床分期及转移呈负相关,接种细胞后,对照组的移植瘤的SATB1的表达量高于miR-200a高表达组,转染miR-200a高表达质粒组的移植瘤最终体积为(615.39±31.05) mm3,而未转染的DU145细胞组瘤体体积为(1 489.09±192.54) mm3,差异有统计学意义(t=7.759,P<0.05),说明在体内实验裸鼠皮下成瘤中miR-200a能够显著抑制前列腺癌裸鼠移植瘤的生长,且免疫组织化学实验结果提示miR-200a高表达组和miR-200a+SATB1共表达组的SATB1表达较未转染组低,表明miR-200a可以抑制SATB1蛋白表达,亦表明SATB1是miR-200a的靶基因。
结论miR-200a在前列腺癌组织中呈低表达,与前列腺癌的临床进展及转移相关,且miR-200a能够下调SATB1的表达,抑制肿瘤生长。