【摘 要】
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目的 观察体外培养大鼠视网膜Mailer细胞在高糖培养环境下谷氨酰胺合成酶(GS)的表达变化,探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对其表达的影响及作用机制。方法出生后3~5d新生Sprague-Dawley大鼠10只,摘除眼球分离视网膜,经胰酶消化后分离纯化视网膜Mailer细胞。并将其随机分为正常对照组、高糖培养组、高糖+5U/m1rhEPO组、高糖+10U/m1rhEPO组、高糖+20U/m
【机 构】
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青岛大学医学院附属医院眼科,266001,青岛大学医学院附属医院眼科,266001
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目的 观察体外培养大鼠视网膜Mailer细胞在高糖培养环境下谷氨酰胺合成酶(GS)的表达变化,探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对其表达的影响及作用机制。方法出生后3~5d新生Sprague-Dawley大鼠10只,摘除眼球分离视网膜,经胰酶消化后分离纯化视网膜Mailer细胞。并将其随机分为正常对照组、高糖培养组、高糖+5U/m1rhEPO组、高糖+10U/m1rhEPO组、高糖+20U/mlrhEPO组、高糖+40U/mlrhEPO组。48h后原位缺口末端标记法检测高糖及不同浓度rhEPO对视网膜MUller细胞凋亡的影响;免疫细胞化学法半定量检测高糖组在不同浓度rhEPO干预下视网膜Mailer细胞GS蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,高糖培养组视网膜Mailer细胞活性下降,细胞大量凋亡,GS蛋白表达下降,差异有统计学意义(t=27.4,P〈0.01)。与高糖培养组比较,不同浓度rhEPO处理组凋亡细胞随着rhEPO浓度的增加显著性减少,差异有统计学意义(t=857.2、2374.6、2473.2、2537.7,P〈0.01),GS蛋白的表达显著性升高,差异有统计学意义(t=3.2、18.0、22.5、26.4,P〈0.05)。结论rhEPO对高糖作用下视网膜Mailer细胞的凋亡具有保护作用,并可上调高糖损伤细胞内下降的GS蛋白表达水平;促进谷氨酸循环,有效降低高浓度谷氨酸的兴奋性毒性作用,可能是其抗高糖损伤的保护机制之一。
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