人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的克隆、表达及鉴定

来源 :医学临床研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jycysn
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【目的】构建人可溶性肿瘤坏死因子受体1基因的重组质粒,进行原核表达。【方法】以Hela细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增sTNFR1全编码区基因片段,构建含有目的片段的T载体克隆及原核表达载体pMAL-c2x重组质粒亚克隆,经异丙基--βD半乳糖苷酶(IPTG)诱导重组质粒菌表达sTNFR1,以淀粉树脂亲和层析法纯化重组蛋白,用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western-blot-ting对重组蛋白进行分析鉴定。【结果】经核苷酸序列测序和Western-blot鉴定,成
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