【摘 要】
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目的：探讨机械牵张对高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在THP-1细胞内移位的影响.方法：构建HMGB1-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合蛋白的真核表达载体.通过两步亚克隆的方法,将HMGB1和EGFP的编
【机 构】
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广州市第一人民医院麻醉科和麻醉学实验室,广州市第一人民医院门诊部
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目的：探讨机械牵张对高迁移率族蛋白B1（HMGB1）在THP-1细胞内移位的影响.方法：构建HMGB1-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合蛋白的真核表达载体.通过两步亚克隆的方法,将HMGB1和EGFP的编码序列以融合蛋白的形式克隆到pcDNA3-HA载体上,随后转染THP-1细胞并施加机械牵张应变,荧光显微镜观察HMGB1在细胞内的表达及移位情况.结果：重组质粒经酶切鉴定证明构建正确,并在THP-1细胞中大量表达.荧光显微镜观察发现,HMGB1-EGFP融合蛋白主要分布于细胞核,经机械牵张18 h,可见
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