重组真核质粒pERFP-C1-hTudor-SN-SN（1～4）的构建和表达

来源 :天津医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：bh2068285

【摘要】

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目的：将人类Tudor-SN蛋白SN（1～4）基因片段分别定向连入pERFP-C1质粒,使Tudor-SN蛋白SN各功能片段与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法：以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,

【作者】

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付晓朱梦瑜高星杰钱宝鑫王保亚赵虹葛林杨洁

【机构】

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天津医科大学免疫教研室,天津医科大学基础医学研究中心,天津医科大学生化教研室

【出处】

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天津医药

【发表日期】

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2011年2期

【关键词】

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质粒遗传载体发光蛋白质类重组融合蛋白质类转染 HELA细胞人类Tudor-SN蛋白 plasmids genetic vectors luminesc

【基金项目】

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国家科技部“863”项目（项目编号：2007AA022115）,国家自然科学基金资助项目（项目编号：30670441,30970562,30670802,30811130394,30911130165,30970582）,天津市科委国际合作项目（项目编号：07JCZDJC07300）,国家自然科学重大研究计划培育项目（项目编号：90919032）,国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金（项目编号

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目的：将人类Tudor-SN蛋白SN（1～4）基因片段分别定向连入pERFP-C1质粒,使Tudor-SN蛋白SN各功能片段与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达。方法：以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的基因,利用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切法将目的片段连接到pERFP-C1载体上,再将构建成功的pERFP-C1-Tudor-SN-SN（1～4）重组质粒转染入HeLa细胞内,在荧光显微镜下观察红色荧光蛋白的表达。结果：以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,

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