过表达三角褐指藻苹果酸酶基因提高E.coli脂肪酸合成能力研究

来源 :中国海洋大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：axiaaawei

【摘要】

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为验证三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）苹果酸酶基因的功能,本研究将PtME1插入pET-30a中得到重组质粒pET30a-PtME1。IPTG诱导后,携带pET30a-PtME1的大肠杆菌BL21（DE3）高效

【作者】

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吕娜娜朱葆华鹿琳杨官品潘克厚

【机构】

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中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室应用微藻生物学研究室,中国海洋大学海洋生命学院,国家实验室海洋渔业与食物产出功能实验室

【出处】

：

中国海洋大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2016年5期

【关键词】

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三角褐指藻苹果酸酶脂肪酸原核表达 P.tricornutum malic enzyme gene fatty acid prokaryotic expre

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展计划项目（2011CB200901）, 国家科技支撑计划项目（2011BAD14B01）资助

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为验证三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）苹果酸酶基因的功能,本研究将PtME1插入pET-30a中得到重组质粒pET30a-PtME1。IPTG诱导后,携带pET30a-PtME1的大肠杆菌BL21（DE3）高效表达一分子量约为72kDa的可溶性重组蛋白。重组蛋白经Ni SephroseTM6Fast Flow系统纯化,酶活力达75.18U/mg。GC-MS分析显示表达PtME1提高了大肠杆菌脂肪酸合成能力,其C14∶0、C16∶0、C18∶1及总脂肪酸含量较对照分别提高了3

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