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摘要[目的]了解安徽省养猪场所用饲料黄曲霉毒素B1污染情况，保证养殖场的正常健康生产。[方法]于2017年5—11月对安徽省内不同规模的5家养猪场共采集饲料391组，其中小猪料134组，大猪料257组。用酶联免疫法测定黄曲霉毒素B1含量。[结果]养猪场饲料黄曲霉毒素B1污染情况较为普遍，污染率高达99.5%，饲料黄曲霉毒素B1在飼料中的分布与季节也有一定相关，6—7月梅雨季节，黄曲霉毒素B1超标情况最为严重。同时用料塔储存的饲料，比单纯用饲料库储存的饲料，其黄曲霉毒素B1污染情况更加严重。[结论]该研究为企业正常健康生产和人类的动物性食品安全检测提供依据。
关键词黄曲霉毒素B1;养猪场;污染;安徽省
中图分类号S816文献标识码A
文章编号0517-6611（2019）03-0186-03
doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.03.058
黄曲霉毒素是由寄生曲霉、黄曲霉等产生的代谢产物，能损害人和动物的肝脏甚至引起动物癌变致死[1]，1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为1类致癌物。在所有的黄曲霉毒素中尤以黄曲霉毒素B1在饲料中存在最为广泛，毒性最为强烈，其毒性是氰化钾的10倍、砒霜的68倍、二甲基亚硝胺的75倍、敌敌畏的100倍，与苯并芘、亚硝胺类并称为三大致癌物质[2-4]。近2年来，随着人民群众对食品安全的日益关注，作为食品安全的源头，饲料的霉菌毒素污染也被人们逐渐关注，黄曲霉毒素B1作为饲料中最危险的霉菌毒素日益受到人们的重视。安徽省位于长江中下游地区，在气候上属于暖温带与亚热带的过渡地区，春暖多变，夏雨集中，受梅雨季节的影响比较大，春夏季温度高湿度大，饲料比较容易发生霉变[5]。为了更好地了解养殖场饲料受污染情况，从而采取正确的应对方法，保证养殖场正常健康的生产，从源头上保证动物类食品的安全，笔者于2017年5—11月连续对安徽省内5家不同规模的养猪场所使用的饲料进行了黄曲霉毒素B1含量的检测。
1材料与方法
1.1样品采集
该试验在安徽省内共选取不同规模的5个养猪场，猪场规模信息及饲料保存方式详见表1。
样品采集时间为2017年5—11月，采集样品饲料共计391组，按照GB/T 14699.1—2005《饲料采样方法》标准的要求[6]，多点采集，每份样品500 g，粉碎过20目筛，密封存放于通风阴凉处保存。样品种类统计信息详见表2。
1.2分析方法
采用GB/T 17480—2008《饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法》[7]测定样品中的黄曲霉毒素B1，试剂盒为江苏省苏微微生物研究有限公司生产的酶联免疫试剂盒，最低检出浓度为0.1 ng/mL，按试剂盒要求的方法进行测定。
各类饲料黄曲霉毒素B1限量标准和污染程度判断标准[8-9]，详见表3。其中限量标准参见GB 13078—2017 《饲料卫生标准》，污染程度判断标准：检出～限量值为轻度污染，限量值～5倍限量值为中度污染，大于5倍限量值为重度污染。
2结果与分析
2.1不同猪场饲料黄曲霉毒素B1检测结果
从表4可以看出，养猪场饲料黄曲霉毒素B1的检出率是非常高的，5—11月份持续7个月的连续采样检测发现，391组样品中仅2组样品中黄曲霉毒素B1未检出，检出率高达99.5%。共有24组样品超过饲料卫生标准允许的限量，属于中度污染，超标率占所有饲料的6.1%，此次检测结果无重度污染情况发生。在这5家养猪场中，用料库保存饲料，并且保持通风干燥的2家猪场黄曲霉素B1虽然有检出，但是基本上检出含量很低，全部没有超过国标卫生标准的限量值，而另外3家猪场，采用料库，饲料塔相结合的方式储存饲料，采用玻璃、钢制以及塑料材质的饲料塔储存的，其储存饲料中的黄曲霉毒素B1均有超标现象发生，超标率占这3家猪场饲料总数的9.6%。其中小猪料污染较为严重，超过国标卫生标准限量值的有21组，占超标饲料的87.5%。
2.2不同季节饲料黄曲霉毒素B1检测结果
按照不同月份采集样品对此次试验饲料进行统计之后发现（表5），基本上每个月的饲料黄曲霉毒素B1都有超标的现象发生，虽然每个月的超标率各有不同，但是黄曲霉毒素B1的检出含量分布大致呈两头低、中间高的态势，其中6、7月份是饲料检出黄曲霉毒素B1含量较高的月份，8、9、10、11月黄曲霉毒素B1的最高检出量逐步下降，小猪料逐渐接近限量要求，大猪料黄曲霉毒素B1的检测值逐渐恢复在限量标准要求之内。
3讨论
此次试验结果表明，养猪场饲料黄曲霉毒素B1污染情况较为普遍，污染率高达99.5%，中度污染率达6.1%，此次试验的391组饲料样品中并未发现严重污染的饲料。但是需要注意的是此次试验检测的饲料黄曲霉毒素B1含量最高的达38.9 μg/kg，已接近4倍饲料卫生标准允许限量，同时饲料在养猪场的流转时间比较短，最长保存时间为15 d，这也可能是饲料未达严重污染程度的可能性之一。夏季饲料的保质期为45 d，春秋季保质期为60 d，如果按照最长保质期时间来储存饲料，不排除饲料会出现严重污染的情况。
此次试验中，采用料库保存饲料并保持通风干燥环境的2家养猪场，黄曲霉毒素B1虽然有检出，但是均未出现超标现象，由于黄曲霉和寄生曲霉广泛存在于自然界土壤、植物上，在农作物正常生长期就可能感染霉菌孢子，产生黄曲霉毒素B1，所以在此次试验中，试验饲料中出现黄曲霉毒素B1的情况比较普遍，这可能是配制饲料的原料在收获时已在田间感染了部分黄曲霉和寄生曲霉。此次试验中的另外3家养猪场除料库外，另采用玻璃、钢制及塑料制料塔保存饲料，经过采样检验，发现其中储存的饲料黄曲霉毒素B1均有超标现象发生，占这3家饲料总数的9.6%，其中小猪料污染较为严重，超过国标卫生标准限量值的有21组，占超标饲料的87.5%，超标情况尤以夏季情况较为突出。这可能是因为料塔本身属于一个比较封闭的环境，空间相对狭小，空气不流通，饲料在其中长时间储存，会造成局部发热、潮湿等问题，给霉菌提供了一个相对良好的生长环境，从而造成黄曲霉毒素B1超标的情况发生。需要注意的是此次试验小猪料超标数量比较多，这是因为国家饲料卫生标准对于小猪料黄曲霉毒素B1的限量要求为10 μg/kg，限量要求更加严格，所以此次试验结果并不代表大猪料黄曲霉毒素B1的污染情况好于小猪料。 从此次试验结果还可以看出，在7个月的持续监测中发现，从5月份开始，饲料中黄曲霉毒素B1的含量随时间变化而逐步增加至7月份达到最高，此后含量缓慢减小，这可能是因為安徽省处于长江中下游地区，每年的6、7月份正好处于梅雨季节，高温高湿，正是霉菌适宜生长的环境条件，此时如果饲料保存不当，极易造成霉变，从而造成黄曲霉毒素B1超标的现象发生。
4结语
由此次试验的检测结果可以看出，安徽省养猪场内使用的配合饲料普遍存在有黄曲霉毒素B1污染的情况。但是大多数情况下还处于相对可控的状态。在生产实践中，养殖企业除了需要注意采购正规厂家生产的饲料外，还需注意的是由于黄曲霉毒素B1属于仓储性毒素，饲料的储存条件尤为重要，在实际生产中对于正常进场的饲料做到不压料，提高饲料流转速度，并对储存的饲料采取先进先出制，确保饲料在仓库里不积压，降低霉菌生长产生毒素的可能性。同时，在饲料保存上，注意保持饲料的水分含量低于14%，保持饲料库的通风、干燥，预防“热点”发生[10]。对于采用料塔存储饲料的企业来说，需要注意料塔中的卫生死角，加大料塔中饲料的流转速度，避免造成局部高温高湿的环境，减少不必要的损失，从而让企业能正常健康的生产，从源头保障人类的动物性食品安全。
参考文献
[1] 计成，赵丽红.黄曲霉毒素生物降解的研究及前景展望[J].动物营养学报，2010，22（2）：241-245.
[2] 陈志娟.玉米中黄曲霉毒素降解与去除的研究[D].北京：中国农业科学院，2010.
[3] SAHOO P K，MUKHERJEE S C.Immunosuppressive effects of aflatoxin B1 in Indian major carp （Labeo rohita）[J].Comparative immunology，microbiology and infectious diseases，2001，24：143-149.
[4] 易中华，彭莉.饲料中霉菌毒素对动物免疫功能的影响[J].饲料工业，2010，31（5）：43-46.
[5] 贺亮，徐乾琨，贺峻琳，等.黄曲霉毒素的研究进展[J].中国草食动物科学，2016，36（4）：54-57.
[6] 苏晓鸥，陈新，冯忠华，等.饲料 采样：GB/T 14699.1—2005[S].北京：中国标准出版社，2005.
[7] 李利东，宓晓黎，袁建兴，等.饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法：GB/T 17480—2008[S].北京：中国标准出版社，2008.
[8] 李军，严寒，蒋惠岚，等.广西种猪场饲料霉菌毒素调查报告[J].饲料工业，2008，29（6）：62-64.
[9] 沙玉圣，王黎文，武玉波，等.饲料卫生标准：GB 13078—2017[S].北京：中国标准出版社，2017.
[10] 熊江林，周华林，王宗俊，等.黄曲霉毒素对畜禽的毒性及防控技术研究进展[J].家畜生态学报，2017，38（2）：77-82.
关键词黄曲霉毒素B1;养猪场;污染;安徽省
中图分类号S816文献标识码A
文章编号0517-6611（2019）03-0186-03
doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.03.058
黄曲霉毒素是由寄生曲霉、黄曲霉等产生的代谢产物，能损害人和动物的肝脏甚至引起动物癌变致死[1]，1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为1类致癌物。在所有的黄曲霉毒素中尤以黄曲霉毒素B1在饲料中存在最为广泛，毒性最为强烈，其毒性是氰化钾的10倍、砒霜的68倍、二甲基亚硝胺的75倍、敌敌畏的100倍，与苯并芘、亚硝胺类并称为三大致癌物质[2-4]。近2年来，随着人民群众对食品安全的日益关注，作为食品安全的源头，饲料的霉菌毒素污染也被人们逐渐关注，黄曲霉毒素B1作为饲料中最危险的霉菌毒素日益受到人们的重视。安徽省位于长江中下游地区，在气候上属于暖温带与亚热带的过渡地区，春暖多变，夏雨集中，受梅雨季节的影响比较大，春夏季温度高湿度大，饲料比较容易发生霉变[5]。为了更好地了解养殖场饲料受污染情况，从而采取正确的应对方法，保证养殖场正常健康的生产，从源头上保证动物类食品的安全，笔者于2017年5—11月连续对安徽省内5家不同规模的养猪场所使用的饲料进行了黄曲霉毒素B1含量的检测。
1材料与方法
1.1样品采集
该试验在安徽省内共选取不同规模的5个养猪场，猪场规模信息及饲料保存方式详见表1。
样品采集时间为2017年5—11月，采集样品饲料共计391组，按照GB/T 14699.1—2005《饲料采样方法》标准的要求[6]，多点采集，每份样品500 g，粉碎过20目筛，密封存放于通风阴凉处保存。样品种类统计信息详见表2。
1.2分析方法
采用GB/T 17480—2008《饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法》[7]测定样品中的黄曲霉毒素B1，试剂盒为江苏省苏微微生物研究有限公司生产的酶联免疫试剂盒，最低检出浓度为0.1 ng/mL，按试剂盒要求的方法进行测定。
各类饲料黄曲霉毒素B1限量标准和污染程度判断标准[8-9]，详见表3。其中限量标准参见GB 13078—2017 《饲料卫生标准》，污染程度判断标准：检出～限量值为轻度污染，限量值～5倍限量值为中度污染，大于5倍限量值为重度污染。
2结果与分析
2.1不同猪场饲料黄曲霉毒素B1检测结果
从表4可以看出，养猪场饲料黄曲霉毒素B1的检出率是非常高的，5—11月份持续7个月的连续采样检测发现，391组样品中仅2组样品中黄曲霉毒素B1未检出，检出率高达99.5%。共有24组样品超过饲料卫生标准允许的限量，属于中度污染，超标率占所有饲料的6.1%，此次检测结果无重度污染情况发生。在这5家养猪场中，用料库保存饲料，并且保持通风干燥的2家猪场黄曲霉素B1虽然有检出，但是基本上检出含量很低，全部没有超过国标卫生标准的限量值，而另外3家猪场，采用料库，饲料塔相结合的方式储存饲料，采用玻璃、钢制以及塑料材质的饲料塔储存的，其储存饲料中的黄曲霉毒素B1均有超标现象发生，超标率占这3家猪场饲料总数的9.6%。其中小猪料污染较为严重，超过国标卫生标准限量值的有21组，占超标饲料的87.5%。
2.2不同季节饲料黄曲霉毒素B1检测结果
按照不同月份采集样品对此次试验饲料进行统计之后发现（表5），基本上每个月的饲料黄曲霉毒素B1都有超标的现象发生，虽然每个月的超标率各有不同，但是黄曲霉毒素B1的检出含量分布大致呈两头低、中间高的态势，其中6、7月份是饲料检出黄曲霉毒素B1含量较高的月份，8、9、10、11月黄曲霉毒素B1的最高检出量逐步下降，小猪料逐渐接近限量要求，大猪料黄曲霉毒素B1的检测值逐渐恢复在限量标准要求之内。
3讨论
此次试验结果表明，养猪场饲料黄曲霉毒素B1污染情况较为普遍，污染率高达99.5%，中度污染率达6.1%，此次试验的391组饲料样品中并未发现严重污染的饲料。但是需要注意的是此次试验检测的饲料黄曲霉毒素B1含量最高的达38.9 μg/kg，已接近4倍饲料卫生标准允许限量，同时饲料在养猪场的流转时间比较短，最长保存时间为15 d，这也可能是饲料未达严重污染程度的可能性之一。夏季饲料的保质期为45 d，春秋季保质期为60 d，如果按照最长保质期时间来储存饲料，不排除饲料会出现严重污染的情况。
此次试验中，采用料库保存饲料并保持通风干燥环境的2家养猪场，黄曲霉毒素B1虽然有检出，但是均未出现超标现象，由于黄曲霉和寄生曲霉广泛存在于自然界土壤、植物上，在农作物正常生长期就可能感染霉菌孢子，产生黄曲霉毒素B1，所以在此次试验中，试验饲料中出现黄曲霉毒素B1的情况比较普遍，这可能是配制饲料的原料在收获时已在田间感染了部分黄曲霉和寄生曲霉。此次试验中的另外3家养猪场除料库外，另采用玻璃、钢制及塑料制料塔保存饲料，经过采样检验，发现其中储存的饲料黄曲霉毒素B1均有超标现象发生，占这3家饲料总数的9.6%，其中小猪料污染较为严重，超过国标卫生标准限量值的有21组，占超标饲料的87.5%，超标情况尤以夏季情况较为突出。这可能是因为料塔本身属于一个比较封闭的环境，空间相对狭小，空气不流通，饲料在其中长时间储存，会造成局部发热、潮湿等问题，给霉菌提供了一个相对良好的生长环境，从而造成黄曲霉毒素B1超标的情况发生。需要注意的是此次试验小猪料超标数量比较多，这是因为国家饲料卫生标准对于小猪料黄曲霉毒素B1的限量要求为10 μg/kg，限量要求更加严格，所以此次试验结果并不代表大猪料黄曲霉毒素B1的污染情况好于小猪料。 从此次试验结果还可以看出，在7个月的持续监测中发现，从5月份开始，饲料中黄曲霉毒素B1的含量随时间变化而逐步增加至7月份达到最高，此后含量缓慢减小，这可能是因為安徽省处于长江中下游地区，每年的6、7月份正好处于梅雨季节，高温高湿，正是霉菌适宜生长的环境条件，此时如果饲料保存不当，极易造成霉变，从而造成黄曲霉毒素B1超标的现象发生。
4结语
由此次试验的检测结果可以看出，安徽省养猪场内使用的配合饲料普遍存在有黄曲霉毒素B1污染的情况。但是大多数情况下还处于相对可控的状态。在生产实践中，养殖企业除了需要注意采购正规厂家生产的饲料外，还需注意的是由于黄曲霉毒素B1属于仓储性毒素，饲料的储存条件尤为重要，在实际生产中对于正常进场的饲料做到不压料，提高饲料流转速度，并对储存的饲料采取先进先出制，确保饲料在仓库里不积压，降低霉菌生长产生毒素的可能性。同时，在饲料保存上，注意保持饲料的水分含量低于14%，保持饲料库的通风、干燥，预防“热点”发生[10]。对于采用料塔存储饲料的企业来说，需要注意料塔中的卫生死角，加大料塔中饲料的流转速度，避免造成局部高温高湿的环境，减少不必要的损失，从而让企业能正常健康的生产，从源头保障人类的动物性食品安全。
参考文献
[1] 计成，赵丽红.黄曲霉毒素生物降解的研究及前景展望[J].动物营养学报，2010，22（2）：241-245.
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[3] SAHOO P K，MUKHERJEE S C.Immunosuppressive effects of aflatoxin B1 in Indian major carp （Labeo rohita）[J].Comparative immunology，microbiology and infectious diseases，2001，24：143-149.
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[6] 苏晓鸥，陈新，冯忠华，等.饲料 采样：GB/T 14699.1—2005[S].北京：中国标准出版社，2005.
[7] 李利东，宓晓黎，袁建兴，等.饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法：GB/T 17480—2008[S].北京：中国标准出版社，2008.
[8] 李军，严寒，蒋惠岚，等.广西种猪场饲料霉菌毒素调查报告[J].饲料工业，2008，29（6）：62-64.
[9] 沙玉圣，王黎文，武玉波，等.饲料卫生标准：GB 13078—2017[S].北京：中国标准出版社，2017.
[10] 熊江林，周华林，王宗俊，等.黄曲霉毒素对畜禽的毒性及防控技术研究进展[J].家畜生态学报，2017，38（2）：77-82.