【摘 要】
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目的:研究经冠状动脉(冠脉)内导入腺病毒载体介导的重组β-gal基因后心肌的转染效率,以证明冠脉内导入途径是重组基因导入心脏的可行途径.方法:将1.53×1012 pfu重组β-gal腺
【机 构】
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十堰市太和医院心内科,湖北十堰,442000;武汉大学人民医院心内科
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目的:研究经冠状动脉(冠脉)内导入腺病毒载体介导的重组β-gal基因后心肌的转染效率,以证明冠脉内导入途径是重组基因导入心脏的可行途径.方法:将1.53×1012 pfu重组β-gal腺病毒经冠脉造影导管由左冠脉分别导入到7头雄性Yorkshire猪心脏中,于术后1、2、4及8周处死动物,取左右冠脉、3～5 mm厚的不同部位的心肌,经1.25%戊二醛固定20 min,用PBS洗涤3次,在室温下用X-gal染色液染色16～24 h,脱水、石蜡包埋、切片及苏木精-伊红复染,光镜下计算出表达β-gal的心肌细胞百分数即为转染效率.结果:经冠脉内导入重组基因后,于术后1周即有β-gal表达,2周达高峰,心肌细胞的转染效率高达45.57%,左冠脉壁全层、心肌间质中均有β-gal表达,4周β-gal表达下降,8周β-gal恢复至基线水平.结论:经冠脉内导入重组腺病毒,心肌细胞及冠脉壁重组基因表达效率高,说明冠脉内导入重组目的基因可能是冠心病基因治疗中可行有效的方法.
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