【摘 要】
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目的 研究成人脂肪基质细胞(ADSC)诱导分化前、后细胞的生物学特性和超微结构特征.方法 体外分离、培养ADSC,应用化学诱导剂对其进行诱导,倒置显微镜下观察ADSC及其诱导分化
【机 构】
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华北煤炭医学院附属开滦医院神经内科
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目的 研究成人脂肪基质细胞(ADSC)诱导分化前、后细胞的生物学特性和超微结构特征.方法 体外分离、培养ADSC,应用化学诱导剂对其进行诱导,倒置显微镜下观察ADSC及其诱导分化细胞的形态;免疫细胞化学检测神经巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达情况;Real-time PCR检测ADSC诱导分化前、后Nestin、GFAP基因mRNA的表达情况;透射电镜观察诱导分化细胞的超微结构.结果 体外培养的ADSC形态类似成纤维细胞,可在体外稳定扩增10代以上.诱导分化的细胞具有星形胶质细胞的超微结构特征;Nestin在细胞质中呈阳性表达,GFAP在细胞质及细胞核中均呈阳性表达.两种蛋白的阳性表达率在诱导14d时达到高峰分别为:Nestin(14.4 ±3.6)%,GFAP(87.3±5.3)%,此后两种蛋白的阳性表达率保持不变.Nestin及GFAP基因mRNA在诱导前及诱导后(1 d、7d、14d、20d)各时间点均有表达,且mRNA的平均相对浓度随着诱导时间的延长逐渐增高,Nestin在诱导后14d达到最高水平,GFAP在诱导后20d达到最高水平(P
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