mIL-18腺病毒载体构建及在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达

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目的构建表达mIL-18基因的腺病毒载体,并转染大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs),观察其在rBMSCs中的表达,为脑胶质瘤的基因治疗实验研究奠定基础。方法mIL-18基因亚克隆于穿梭质粒pAdtrackCMV上,构建的pAdtrackCMV—mIL-18线性化后转化已含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,挑选同源重组质粒,线性化后HEK293细胞包装,CsCI纯化。体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测细胞免疫表型;然后转染rBMScs,通过荧光显微镜、RT—
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