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目的优化白花败酱草Patrinia villosa Juss.的提取纯化工艺。方法以总皂苷含有量为评价指标,乙醇体积分数、溶剂用量、提取时间、提取次数为影响因素,正交试验优化提取工艺。通过静、动态吸附与解吸实验,优化纯化工艺。通过MTT法,比较纯化前后提取物对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用。结果最佳提取条件为加10倍量70%乙醇回流提取3次,每次1 h;最佳纯化条件为采用D101型大孔树脂,0.25 g/m L提取液,药材量-树脂比例0.75∶1,体积流量2 BV/h,2.5 BV水除杂后,5 BV 75%乙醇洗脱,总皂苷纯度为84.51%,回收率为40.86%。纯化后,总皂苷体外抑制SMMC-7721细胞的作用显著提高,IC50比纯化前降低58%。结论该方法简便、快速、准确,可用于白花败酱草总皂苷的提取纯化。