【摘 要】
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采用RT-PCR方法扩增马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）衣壳蛋白（coat protein,CP）基因,将其连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒pEHISTEV-PVY-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IP
【机 构】
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山东农业大学植物保护学院,山东省农业微生物重点实验室,临沂市烟草公司
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31571984);国家重点研发计划项目(SQ2017ZY060102)
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采用RT-PCR方法扩增马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）衣壳蛋白（coat protein,CP）基因,将其连接到原核表达载体pEHISTEV上,获得重组质粒pEHISTEV-PVY-CP,转化大肠杆菌Rosetta,经IPTG诱导后,可以表达出分子量为35 k D的融合蛋白。切胶回收融合蛋白,免疫新西兰大耳兔制备PVY CP抗血清。间接ELISA结果表明,该抗血清的效价为1∶16384,Western blot分析表明该抗血清只与感染PVY的普通烟植株有特异性反应,而与健康普通烟和感
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