粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

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利用超声波裂解法制备粪肠球菌的裂解物作为抗原包被酶标反应板,通过棋盘滴定方法筛选最佳反应条件,成功地建立了检测致羔羊脑炎粪肠球菌抗体的间接ELISA。在此间接ELISA中,抗原最佳包被浓度为37.57μg/mL,被检血清的最佳稀释度为1:100。建立的间接ELISA的灵敏度是微量凝集反应的25~100倍。交叉试验、阻断试验、重复性试验表明,该方法具有重复性好、特异性强、操作简便快速等特点。确立的检测ELISA效价的回归方程lg[1/ET]=1.275+2.730 D405nm,可用于抗体定量测定。利用此方
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