猪肌肉生长抑制素RNA干涉载体的构建与验证

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目的:构建针对猪肌肉生长抑制素mRNA的RNA干涉载体,并体内验证其有效性.方法:分别体外转染化学合成4个19 bp的siRNA片段获取针对肌肉生长抑制素的序列,构建RNA干涉载体,将上述载体注射到猪股四头肌中,RT-PCR检测证明其表达有效性及生肌调节因子mRNA水平的变化.结果:获得了针对肌肉生长抑制素的2个小干涉RNA序列,构建了2个重组载体,股四头肌注射混合后的等量重组载体,RT-PCR显示注射重组RNA干涉载体可显著降低肌肉生长抑制素的mRNA水平(约降低了40%),生肌调节因子mRNA水平显著上调(分别约为对照组的2.1 ~3.9倍).结论:该试验为在转基因动物的肌肉中表达外源基因奠定了基础.
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