【摘 要】
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目的 阐释益气扶正方调控肿瘤相关巨噬细胞表型转化的作用及机制.方法 ①建立体外诱导的M2型肿瘤相关巨噬细胞模型,采用CCK-8实验确定益气扶正方的给药浓度,流式技术鉴定给药后各组M1和M2型肿瘤相关巨噬细胞的表达情况,利用RT-PCR技术检测给药后各组肿瘤相关巨噬细胞中CCL2、AMPK、mTOR mRNA表达水平,Western blot检测给药后各组肿瘤相关巨噬细胞中CCL2、AMPK、mTOR蛋白的表达水平.②建立Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤模型,流式检测各组瘤体中M1和M2型肿瘤相关巨噬细胞的比例
【机 构】
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上海实验动物研究中心 上海200032;上海中医药大学附属市中医医院肿瘤二科 上海200071
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目的 阐释益气扶正方调控肿瘤相关巨噬细胞表型转化的作用及机制.方法 ①建立体外诱导的M2型肿瘤相关巨噬细胞模型,采用CCK-8实验确定益气扶正方的给药浓度,流式技术鉴定给药后各组M1和M2型肿瘤相关巨噬细胞的表达情况,利用RT-PCR技术检测给药后各组肿瘤相关巨噬细胞中CCL2、AMPK、mTOR mRNA表达水平,Western blot检测给药后各组肿瘤相关巨噬细胞中CCL2、AMPK、mTOR蛋白的表达水平.②建立Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤模型,流式检测各组瘤体中M1和M2型肿瘤相关巨噬细胞的比例.结果 ①体外实验表明,益气扶正方能下调M2型TAMs标志物的表达,上调M1型TAMs标志物的表达;同时益气扶正方下调体外诱导的M2型肿瘤相关巨噬细胞中通路相关基因CCL2、mTOR mRNA表达(P＜0.001),上调AMPK mRNA表达(P＜0.05);Western blot检测结果显示,与模型组比较,中药组CCL2、mTOR蛋白表达下调,AMPK表达上调(P＜0.001).②动物实验显示,益气扶正方可以抑制Lewis肺癌小鼠移植瘤的生长,瘤体细胞的流式检测结果显示,益气扶正方能抑制肿瘤组织中M2型肿瘤相关巨噬细胞表达,上调M1型肿瘤相关巨噬细胞表达,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 益气扶正方能抑制TAMs向M2型转化,其对TAMs极化的重要信号通路CCL2/AMPK/mTOR中各信号分子表达起着调控作用,说明该方可能通过调控信号通路CCL2/AMPK/mTOR,干预TAMs极化,从而发挥抑制肿瘤转移的作用.
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