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探讨组织蛋白酶D绿色荧光蛋白复合质粒（GFP-CatD）技术在成纤维细胞慢性光损伤研究中的作用。
方法长波紫外线（UVA）25 J/cm2每天照射人皮肤成纤维细胞1次，共21 d，构建慢性光损伤成纤维细胞模型。构建GFP-CatD质粒，将其转染入慢性光损伤成纤维细胞，荧光显微镜观察绿色荧光标记的组织蛋白酶D表达，Western印迹检测组织蛋白酶D表达，流式细胞仪检测转染GFP-CatD后的慢性光损伤成纤维细胞凋亡率，噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖率。
结果慢性光损伤成纤维细胞转染GFP-CatD质粒96 h，可见绿色荧光蛋白组织蛋白酶D在慢性光损伤细胞胞质内表达。Western印迹结果显示，慢性光损伤成纤维细胞转染GFP-CatD质粒后，组织蛋白酶D蛋白表达为未转染细胞的1.28倍。细胞凋亡检测结果发现，转染后的光老化成纤维细胞凋亡细胞率为4.29% ± 1.30%，与无转染的空白对照组凋亡细胞率3.03% ± 1.70%比较，差异无统计学意义（P> 0.05）。MTT细胞增殖检测结果发现，转染后的光老化成纤维细胞的细胞增殖率为45.20% ± 4.70%，无转染质粒的光老化成纤维细胞为43.60% ± 3.90%（P> 0.05）。
结论GFP-CatD复合质粒转染慢性光损伤成纤维细胞可示踪到组织蛋白酶D荧光蛋白，且不影响慢性光损伤成纤维细胞原有的正常生物活性和周期。