【摘 要】
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目的 探索荧光定量PCR技术在献血者疟原虫检测中的应用.方法 参照文献设计针对疟原虫18S小亚基核糖体RNA(18SrRNA)基因序列的通用引物和探针并构建标准质粒;将标准质粒和4种
【机 构】
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江苏省血液中心,江苏南京210042
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目的 探索荧光定量PCR技术在献血者疟原虫检测中的应用.方法 参照文献设计针对疟原虫18S小亚基核糖体RNA(18SrRNA)基因序列的通用引物和探针并构建标准质粒;将标准质粒和4种疟原虫阳性标本进行梯度倍比稀释后进行荧光定量PCR检测,建立符合本实验室条件的实验体系,与巢式PCR方法进行灵敏度比较,并对47例献血者进行疟原虫筛查.结果 应用荧光定量PCR技术检测标准质粒的检测下限是10-1copy/μL,用于恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)、间日疟原虫(P.vivax)、三日疟原虫(P.malaria)和卵形疟原虫(P.ovale)阳性标本检测,其下限均为1 copy/μL,且整个PCR程序仅用时1 h 59 min;应用荧光定量PCR技术检测47例献血者全血标本,均为阴性;应用巢式PCR技术检测间日疟原虫和三日疟原虫的检测下限为102 copy/μL,检测灵敏度明显低于荧光定量PCR检测方法.结论 荧光定量PCR检测方法具有操作简单、快速、灵敏、经济等特点,通过针对本实验室的特定实验优化,更加适用于献血者疟原虫的快速大量筛查.
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