牛肌肉生成抑制素基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

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【摘要】

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将构建的牛pMD 18-T-MSTN克隆载体与真核表达载体pef-dhfr1a酶切,回收牛MSTN目的片段及pef-dhfr1a载体,构建了牛MSTN基因的真核表达质粒pef-dhfr1a-MSTN,然后转染COS-7细胞,

【作者】

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吕文发赵静姚淑珍王军

【机构】

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吉林农业大学

【出处】

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中国兽医科技

【发表日期】

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2005年12期

【关键词】

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牛肌肉生成抑制素基因真核表达 COS-7细胞 cattle myostatin gene eukaryotic expression COS-7 cel

【基金项目】

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中国科学院资助项目

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将构建的牛pMD 18-T-MSTN克隆载体与真核表达载体pef-dhfr1a酶切,回收牛MSTN目的片段及pef-dhfr1a载体,构建了牛MSTN基因的真核表达质粒pef-dhfr1a-MSTN,然后转染COS-7细胞,将牛MSTN成熟蛋白编码序列在COS-7细胞中进行了表达.提取转染细胞的总RNA,采用RT-PCR和Western-blotting方法,分别从mRNA水平和蛋白质水平上检测到了牛MSTN基因在COS-7细胞中的表达产物,证明已经成功构建出该基因的真核表达载体.

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