特异性针对小鼠VEGFa基因的siRNA慢病毒载体的构建

来源 :山东大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：blueskyjava

【摘要】

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目的以小鼠VEGFa基因为靶基因，构建携带短发夹状干扰RNA（siRNA）的慢病毒载体。方法设计并合成三对包含靶序列和一对针对无关序列的互补寡核苷酸链，克隆到pRNAT-U6．2／Lenti质粒；从小

【作者】

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周炜冯进波王旭平姜虹刘春喜王荣丁士芳

【机构】

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山东大学齐鲁医院放射科,教育部和卫生部心血管重构和功能研究重点实验室,山东大学齐鲁医院ICU

【出处】

：

山东大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2008年12期

【关键词】

：

血管内皮生长因子 RNA干扰短发夹RNA 慢病毒属 Vascular endothelial growth factor RNA interference S

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目的以小鼠VEGFa基因为靶基因，构建携带短发夹状干扰RNA（siRNA）的慢病毒载体。方法设计并合成三对包含靶序列和一对针对无关序列的互补寡核苷酸链，克隆到pRNAT-U6．2／Lenti质粒；从小鼠NIH／3T3细胞扩增、纯化VEGFacDNA，构建pCDNA—VEGF质粒；实验分6组，pCDNA—VEGF质粒或／和siRNA慢病毒质粒共转染NIH／3T3细胞，筛选最有效siRNA慢病毒表达质粒；将筛选siRNA慢病毒表达质粒和pRNAT-Negative质粒与慢病毒包装质粒混合物混合，共转染293T

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