【摘 要】
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目的:建立测定野生四叶参中氨基酸含量的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法:用盐酸水解大别山区野生四叶参中的蛋白质。采用反相高效液相色谱法,色谱条件为:色谱柱:Hypersil
【机 构】
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郑州大学公共卫生学院,郑州大学化学工程学院,郑州大学医学实验中心
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目的:建立测定野生四叶参中氨基酸含量的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。方法:用盐酸水解大别山区野生四叶参中的蛋白质。采用反相高效液相色谱法,色谱条件为:色谱柱:HypersilODS-BP C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相A:醋酸-醋酸钠缓冲液(pH=7.2);流动相B:甲醇,流速1.0mL/min,流动相采用梯度洗脱方式,荧光检测波长为450nm。分析四叶参中各种氨基酸含量。采用外标法定量。结果:氨基酸在25.0~800.0μmol/L范围内浓度与色谱峰面积有良好的线性关系(r≥0.993),该方法的回收率在89.5%~109.2%,RSD在3.2%~9.0%,检测限在1.0~3.7μmol/L。野生四叶参中含有12种氨基酸,总氨基酸含量为51.49mg/g,必需氨基酸含量为6.95mg/g。结论:建立的分析方法精密度好、准确度高,适用于野生四叶参中氨基酸含量的分析。
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